دراسة عن انتاج واستخدام لقاح الطاعون البقري المحضر على خلايا الفيرو في مصر
الملخص: علي الرغم من أن لقاح طاعون البقري النسيجي الذي استحدث بواسطة العالم بلورايت يتصف بانه مأمون في الإستعمال و يحدث مناعية عالية بالحيوان لكن لكونه محضر علي مزارع نسيجيه أولية (مثل خلايا كلي الأبقار) فإن تلك المزارع يعاب عليها إنها معقدة في طريقة التحضير و مكلفة و تستهلك الكثير من الوقت و علي الرغم من ذلك فإنها تعطي عدد محدود من مرات إعادة الزرع كما إنها تعتبر مصدراً للتلوث يصعب السيطرة عليه بالإضافة علي احتوائها علي خلايا تختلف فيما بينها من حيث القابلية للعدوي بفيروس لقاح الطاعون البقري. و قد خصصت. و قد خصصت هذه الدراسة لتلافي السلبيات السابق ذكرها و ذلك بإختيار خط نسيجي ملائم (خلايا كلي القرد الأخضر الأفريقي) لإستزراع لقاح الطاعون البقري عليها و ذلك من خلال تهيئة كل الظروف المناخية و الإستزراعية لتحضير اللقاح بتلك الخلايا لتحقيق أعلي معدل نموي للفيروس بها و الوصول إلي أنسب و أيسر و أرخص الطرق التي من شأنها الحصول علي لقاح عالي المناعية و مأمون الإستعمال و قد أوردت هذه الدراسة الآتي :
1-وجد أن التحصين عند درجة 37°م هو أنسب درجة للحصول علي أعلي نمو للفيروس.
2-كما وجد أن إستعمال الوسط الغذائي عند التركيز الأيوني 7.8 يكون أفضل التركيزات حصولاً علي أعلي معيار للفيروس في خلايا القرد الأخضر الأفريقي و يفضل هذا التركيز علي التركيزات الأيونية 7.0 ، 7.4 ، 8.2 .
3-وجد أنه بإستعمال جرعة العدوي التضاعفية (MOI) (3) قد أعطي معيارا افضل بكثير من إستعمال جرعة العدوي التضاعفية (1) . و علي الرغم من أن جرعة العدوي التضاعفية (5) قد أعطت أيضاً زيادة كبيرة في معيار الفيروس إلا أن إستخدام الجرعة (3) يعتبر أفضل من حيث توفير العترة البذرة المستخدمة في تحضير اللقاح (Seed Virus) .
4-و بتطبيق طريقة حقن الخلايا و هي معلقة (Cell suspension) وجد أنه أفضل من الحقن علي خلايا كاملة النمو من حيث توفير المدة اللازمة لإستزراع الخلايا ( حوالي 24-48 ساعة) مما يوفر الكثير من الجهد – الوقت و النفقات و يعود ذلك بشكل إيجابي علي عمليتي تحضير و سعر اللقاح.
5-ثبت أيضاً أنه بإستخدام نظام الخلايا الدواره و الزجاجات الخاصة بها يعطي معياراً أعلي بكثير من نظيره الذي يعتمد علي الزجاجات الثابتة و ذلك لزيادة السطح الخاص بنمو الخلايا و لقدرة الفيروس علي إصابة عدد أكبر من الخلايا و بالتالي إعطاء معيار أعلي من الطريقة الثابتة.
6-و بمراعاة التعديلات السابق ذكرها في تحضير لقاح الطاعون البقري النسيجي علي خلايا الفيرو- تم إنتاج ثلاث دفعات تجريبية و كان المعيار هو 10 6.4 ، 10 6.6 ، 10 6.5 جرعة خلايا نسيجية نصف مميتة علي الترتيب.
7-و قد تم إختبار الدغعات الثلاث لإثبات خلوها من كافة أنواع التلوث (الباكتيري ، الفطري ، و الميكوبلازمي ) و قد ثبت صلاحية هذه الدفعات للإستخدام كلقاح للطاعون البقري.
8-تم خلط عدد ثابت من الدفعات الثلاث بهدف تحضير خليط منهم يستخدم في مرض الطاعون البقري (و قد كان معيار الخليط هو 6.5 لوغاريتم 10 جرعة خلايا نسيجية نصف مميتة).
9-تم حقن مجموعتين من عجول صالحة للعدوي لمرض الطاعون البقري بمخلوط الدفعات الثلاث و ذلك علي النحو التالي :

المجموعة الاولي:
تم حقن عجول تحت الجلد بالجرعة الحقلية للقاح الطاعون البقري و قد أبقي علي العجلين كضوابط للتجربة.

المجموعة الثانية
تم حقن ثلاث حيوانات بمائة مثل الجرعة الحقلية و قد أبقي علي العجليين الباقيين كضوابط مخالطة للحيوانات المحقونة بغرض عمل تجربة الأمان للقاح المحضر و قد لوحظ أن درجات الحرارة للحيوانات المحقونة من المجموعتين لم تظهر أية ارتفاعات غير مرغوب فيها – كما يلاحظ وجود أي أعراض غير طبيعية طيلة 21 يوم بعد الحقن.

10-وجد أن الإستجابة المناعية للحيوانات المحقونة بالمجموعتين تكاد تكون متشابهة. فبعد مرور سبعة أيام علي الحقن كان معيار الأجسام المناعية هو الغير مخفف (Undiluted) و بإنقضاء أسبوعين بعد الحقن كان المعيار يتراوح بين 15 – 25 و بعد ثلاثة اسابيع و صل المعيار لأعلي معدل له (150-200).
11-ظل معيار الأجسام المناعية المقاسة بطريقة السيرم المتعادل علي مستوي الأسبوع الثالث طيلة خمسة عشر أسبوعاً.
12- وجد أن الحيوانات التي استخدمت كضوابط في المجموعة الأولي و تلك التي استخدمت كضوابط مخالطة في المجموعة الثانية لم تتأثر مناعيا طيلة فترة التجربة (15 أسبوع) و ظلت أمصالها خالية تماما من أية أجسام مناعية.

و قد صار من الواضح أن إنتاج لقاح الطاعون البقري النسيجي علي خلايا الفيرو يمكن الوثوق به و أيضاً مأمون و عالي العيارية و أيضاً عالي المناعية فضلا عن أنه سهل التحضير و النخزين و إقتصادي. كما أنه بالإمكان السيطرة علي مختلف مصادر التلوث التي هي السمة الغالبة في اللقاحات المحضرة علي خلايا نسيجية أولية مثل (كلي العجول البقري).
سنة النشر 1996
صفحات 92-94
مكان الإتاحة معهد بحوث الامصال واللقاحات البيطرية
رقم الإتاحة
أسم المركز
الدولة مصر
الناشر Name: كلية الطب البيطري - جامعة القاهرة
المجلد 1 . 1
مؤلفين من مركز البحوث الزراعية
مؤلفين من خارج مركز البحوث الزراعية
    محمد سامي صابر استاذ ورئيس قسم الفيروسات - كلية الطب البيطري جامعة القاهرة
    محمد احمد معاذ معهد بحوث الأمصال واللقاحات البيطرية
المواضيع الخاصة بـ (أجريس) أمراض الحيوان
مصطلحات
أكروفوك		 خلايا. طاعون بقري. فيروس موربيلي. لقاحات.
نوع المنشور رسالة ماجستير
↑